马铃薯种植小课堂,带你了解,马铃薯种薯的

随着马铃薯种薯的不断退化，人们为培养出优质的马铃薯而采用了多种脱毒效果检测，今天和大家分享马铃薯脱毒效果检测的几种方式。

一、指示植物鉴定

所谓指示植物是指具有能够辨别某种病毒的专化性症状的寄主植物。每种病毒都有自己敏感的植物。例如：

马铃薯病毒敏感的植物有：千日红、黄花烟、心叶烟、毛叶曼陀罗。

大丽花病毒的敏感植物有：矮牵牛、黄瓜、苋色莴。

菊花病毒敏感植物有：矮牵牛、豇豆。

指示植物鉴定病毒的方法：

1.摩擦接种法

取培养植物的叶层置于研钵中，加入少量的水和等量的0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.0）。磨成匀浆，将其涂抹在指示植株叶片上，在指示植物的叶片上，撒施金刚砂，通过轻轻摩擦使汁液浸入叶片表皮细胞而不损伤叶片，5分钟后用清水清洗叶面，将指示植物放于有防蚜网罩的温室内，然后视其病斑的有无来判断是否脱除了病毒。

例如：植物液接种后如使千日红叶片产生枯斑；黄花烟、心叶烟呈花叶。证明该植物体内具有马铃薯X病毒。

2.嫁接法

有些植物病毒不是通过汁液传播，而是通过介体传播的，例如草莓丛枝病毒，草莓丛枝病毒是通过一种特殊的蚜虫为介体进行传播的，这种病毒的鉴定需将培养植株的芽嫁接在敏感植物上，根据敏感植物的病症来判断是否脱除了病毒。

二、血清鉴定

1.试管沉淀反应

在抗原--抗体最适比例的条件下，观察有无沉淀的产生来确定被测植株是否带病毒。试管沉淀反应操作简单，需注意的问题：

（1）叶绿体的自发凝：可用磷酸缓冲液提取汁液，再用氯仿处理除去叶绿体，pH保持在6.5～8.5。

（2）抗原抗体最适比例要适合，当抗原过量时会抑制沉淀的形成。

2.免疫双扩散

在半固体凝胶中测定在其中扩散的抗原和抗体间的沉淀反应的方法。与沉淀法比较起来有两个优点。一是节约血清，二是汁液不用特殊处理。

步骤如下：（1）倒胶：一般厚2mm。（2）打孔：多打成梅花型。（3）加样：加血清和汁液。一般加样后在37℃恒温下过夜，即可进行结果观察。扩散沉淀的即为毒株，没有则为无毒株。

3.酶联免疫吸附测定

它是将抗原、抗体的免疫和酶的高效催化反应有机结合起来的一种综合性技术。即通过化学的方法将酶抗体或抗原结合起来，形成酶标记物。

然后将它与相应的抗原或抗体起反应，形成酶标记的免疫复合物。结合在免疫复合物的酶，在遇到相应的底物时，催化无色底物生成有色底物，通过比色计可以准确测定。优点是灵敏度高，测定快速，每次可以同时测定多个样品。

三、电镜检查法

采用电子显微镜，可直接观察样品有无病毒存在，还可以进一步鉴定病毒颗粒大小，形状和结构，这些特征相当稳定，因此电镜检查法既准确又有效，但需要较高的设备和技术。

四、分子检测测法

例如：RT～PCR将待测样品的总RNA与DNA合成的试剂盒进行反应，合成CDNA，然后利用病毒DNA特有的序列设计引物进行PCR反应，即可知道在寄主中是否有病毒基因的表达。

1.脱毒菌的离体保存与繁殖一般在实验室进行，一般每月继代一次，可以在培养基中加入生长延缓剂，如B9和矮壮素可2～3月继代一次，也可放在液氮或4℃冰箱中保存。

2.建立脱毒种薯种苗生产繁殖网络体系：如果试管苗生产成本过高或移栽困难，可将试管苗选择种植在一定控制区域，从繁殖技术和环境隔离上保证较高水平，使得繁殖的种苗能有效地防止病毒的再浸染。

上面这几种马铃薯脱毒效果检测的措施，你了解了吗？若是想要检测马铃薯种薯的状态，不妨尝试一下这几种检测方式吧